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合成法所得為外消旋體，須經外消旋拆開。旋光拆開的方法很多，如用酰基-DL-氨基酸的酶進行水解，再利用游離氨基酸與酰化體的溶解度差進行分離。發酵法菌種為產谷氨酸微球菌(Micrococcusglutamicus.Paracolabacterumcoliforme),產氨短桿菌(Brevibacterumammoniagenes)，大腸桿菌(Escherichiacoli)，產氣氣桿菌(Aerobacteraerogenes)，用葡萄糖、尿素、無機鹽等培養基，生成纈氨酸(1～1.5g/100m1)皆為L-型，無需旋光拆開。生產方法用異丁醛作原料，有多種方法可合成外消旋體Chemicalbook纈氨酸。例如異丁醛與氨生成氨基異丁醇，再與氰化氫合成氨基異丁腈，然后水解得到纈氨酸，外消旋本的拆分也有多種方法，例如用酰基-DL-氨基酸的酶進行水解，再利用游離氨基酸與酰化體的溶解度差進行分離。發酵法生產的纈氨酸皆為L-型，無需旋光拆分。發酵法的菌種為產谷氨酸微球菌，產氨短桿菌，大腸桿菌，產氣氣桿菌。用葡萄糖、尿素、無機鹽等培養基。生產方法方法一、化學合成以異丁醛為原料，與氨及氫氰酸發生斯特克(Styecker)反應，生成α氨基異丁腈，然后水解得DL-纈氨酸，再經拆分得L-纈氨酸。方法二、發酵法葡萄糖、尿素、無機鹽[產生氨酸微球菌或產氨短桿菌等]→[發酵]L-纈氨酸